ABC | Volume 113, Nº5, Novembro 2019

Artigo Original Vasconcelos et al. Efeitos antiarrítmicos do D-limoneno Arq Bras Cardiol. 2019; 113(5):925-932 Figura 1 – Estruturas químicas do d-limoneno (DL) (FW: 136.24). H 2 C CH 3 CH 3 de água introduzido na cavidade do ventrículo esquerdo. Este dispositivo foi acoplado a um transdutor de pressão (FE221, Bridge Amp, ADInstruments, EUA) e um amplificador (PowerLab 4/35, ADInstruments). O sistema foi calibrado utilizando uma coluna de mercúrio. O tempo de pico (ms), que é definido como o tempo necessário para atingir o pico de contração ventricular máxima, e tempo de relaxamento, também foram analisados. Avaliação do efeito antiarrítmico do DL O efeito antiarrítmico de DL foi determinado no modelo animal in vivo utilizando (S)-(−)-Bay K8644, um agonista do canal de cálcio do tipo L (LTCC). A arritmia foi induzida pela administração de (S)-(−)-Bay K8644, (1 mg/kg, i.v.) na veia femoral de ambos os grupos, controle (n = 4) e tratamento com DL (n = 4). DL (10 mg/kg) foi administrado 10 minutos antes do (S)- (−)-Bay K8644 15 Arritmias cardíacas foram observadas por 20 minutos através da análise do registro do ECG. Para uma melhor análise, o tempo total foi dividido em 10 intervalos de 3 min para classificação da arritmia. As arritmias foram determinadas por meio de um sistema de escore modificado previamente validado por Curtis e Walker. 16 As arritmias observadas foram batimentos prematuros ventriculares (BPV), taquicardia ventricular (TV) e fibrilação ventricular (FV). BPVs < 10/período de 3 min foram registrados como 0; BPVs > 10/3 min foram registrados como 1; Episódios de TV de 1 a 5/ período de 3 min foram registrados como 2; > 5 episódios de TV/3 min e /ou qualquer número de episódios de FV e/ou 1 episódio de FV com um período de duração <40 s foi registrado como 3; 2-5 episódios de FV/3 min ou TV e FV com um total combinado com duração < período de 80 s foi registrado como 4; 5 episódios de FV ou TV e FV combinados /3 min com uma duração < 160 s foram registrados como 5; TV ou FV ou ambos/3 min com duração total combinada <300 s foram registrados como 6, e TV ou FV ou ambos/3 min com duração total combinada >300 s foram registrados como 7. Análise estatística A normalidade dos dados foi verificada pelo teste de normalidade de Shapiro-Wilk. Os dados foram representados como média ± DP. Quando apropriado, utilizou-se o teste t de Student não-pareado ou a análise de variância (ANOVA unidirecional, bidirecional) e o teste post hoc de Bonferroni. O nível de significância adotado foi de 5% (p < 0,05). As análises estatísticas foram realizadas utilizando-se o software GraphPad Prism TM 5.0. Resultados Em todos os ratos testados, os valores basais de FC e PAM foram de 371 ± 45 bpm e 114 ± 11 mmHg, respectivamente. A Figura 2A mostra os traçados originais do efeito do DL (1, 5, 10, 20 e 40 mg/kg, i.v.) no sinal pulsátil da pressão arterial de um rato consciente. Nestes animais, o DL, nas doses de 1 e 5 mg/kg, produziu hipotensão transitória e não significativa sem alterar a FC (Figura 2B - gráfico à esquerda). Por outro lado, o DL, nas doses de 10, 20 e 40 mg/kg, produziu bradicardia intensa e persistente (-33,0 ± 21; -57,0 ± 19 e -53,0 ± 30%; n = 6; p < 0,05, respectivamente) (Figura 2B - gráfico à direita) que persistiu por 19 ± 12 min após a administração. Esta bradicardia foi associada à hipotensão apenas nas doses de 20 e 40 mg/kg (-53,0 ± 6 e -28,0 ± 18%; n = 6, p < 0,05, respectivamente). A figura 3A mostra os traçados representativos do ECG para o veículo (parte superior) e 10 min depois da administração i.v. de 10 mg/kg de DL (parte inferior). Como pode ser visto, o DL diminuiu significativamente a FC (p < 0,05) e aumentou o QTc (Figuras 3B e E). Entretanto, o DL não alterou a duração do iPR e do complexo QRS (Figuras 3C e D). No experimento com a técnica de Langendorff, o DL (10‑3 M) causou uma redução significativa na PDVE comparado ao controle (Figura 4A). Os dados médios mostraram que a PDVE diminuiu de 25,2 ± 11,4 mmHg para 5,9 ± 6,1 mmHg (n = 5, p < 0,05, Fig. 4B). O DL também promoveu redução da FC de 228,6 ± 19,1 para 927