ABC | Volume 111, Nº4, Outubro 2018

Artigo Original Luo et al Análise de testes genéticos de fetos com CC Arq Bras Cardiol. 2018; 111(4):571-577 Introdução A cardiopatia congênita (DCC) é um dos defeitos congênitos mais comuns, afetando aproximadamente 1 em cada 100 nascidos vivos. 1-3 Coma disponibilidade de técnicas cirúrgicas avançadas, é possível restaurar a função cardíaca normal ou quase normal após tratamento cirúrgico damaioria dos tipos de CC, de simples comunicações interventriculares (VSD) a anormalidades cardiovasculares mais complexas. No entanto, o prognóstico a longo prazo de um número pequeno, mas significativo, de fetos com CC costuma ser complicado por anormalidades extracardíacas graves, como atraso no desenvolvimento e deficiência mental. Há cada vez mais evidências de que fatores genéticos influenciam o desenvolvimento da maioria dos tipos de CC, 4-6 mas a base genética precisa da maioria dos casos de CC ainda não é totalmente compreendida. As tecnologias atuais de ultrassom são capazes de detectar a maioria das CCs, mas é difícil para os médicos fazerem uma avaliação abrangente dos fetos com CC com base apenas na evidência da ultrassonografia pré-natal, também dificultando o gerenciamento do curso da gravidez já estabelecida. 7 Por isso, o teste genético agora é altamente recomendado para fetos com CC. A cariotipagem tem sido o principal método de diagnóstico para detectar anormalidades cromossômicas associadas a CCs. 8 Nos casos de diagnóstico pré-natal de CC, estima-se que existam até 22 anomalias cromossômicas. 9,10 Hoje, a análise cromossômica por microarray (CMA) tornou-se a primeira escolha em casos de anomalias estruturais fetais detectadas por ultrassonografia. 11,12 O advento da tecnologia da CMA permitiu a busca por deleções ou duplicações cromossômicas submicroscópicas em todo o genoma, conhecidas como variações do número de cópias (CNVs). A CNV é uma forma de variação estrutural no genoma: especificamente, é um tipo de duplicação ou deleção que influencia nos pares de bases, 13 desempenhando também um papel importante na geração de variações necessárias nos fenótipos de populações e de doenças. 14 Estudos recentes demonstraram que foram detectadas CNVs patogênicas em uma proporção considerável dos pacientes com CC, 15,16 e foram encontrados múltiplos locos recorrentes de CNV em pacientes com CCs sindrômicas ou isoladas, como 22q11.2 (região da síndrome de DiGeorge), 7q11.23, 8p23.1, 9q34.3, e 1q21.1. 17-19 Até o momento, apenas alguns estudos relataram testes genéticos em grandes grupos de fetos com CC na China, 20-24 e a relação genótipo-fenótipo ainda não foi totalmente estabelecida. OLaboratório de Genética eMetabolismo doHospital de Saúde Materna e Infantil de Guangxi é um dos maiores centros de diagnóstico perinatal no sul da China. Este estudo teve como objetivo analisar as anormalidades cromossômicas e os desfechos da gravidez em 362 fetos com CC. Métodos Sujeitos Exames de anatomia fetal por ultrassonografia foram realizados rotineiramente em gestantes no Centro de Diagnóstico Pré-natal da Região Autônoma de Guangxi Zhuang, na China. Os exames de anatomia foram realizados entre 20 e 28 semanas de gestação por ultrassonografistas experientes, utilizando máquinas de ultrassom GE E8 (General Electric Healthcare, EUA). Emcaso de suspeita de CC, o ecocardiograma era realizado posteriormente para confirmação. Foram feitos testes para a identificação de defeitos cardíacos fetais em um total de 8.430 gestações entre junho de 2012 e junho de 2016, e 362 fetos com CC foram identificados. O Comitê de Ética Médica do Hospital de Saúde Materno-Infantil de Guangxi aprovou o protocolo do estudo (Aprovação nº. 160220), e os pais de todos os fetos com CC selecionados deram seu consentimento por escrito. Teste por SNP microarray Todas as amostras de líquido amniótico ou sangue do cordão umbilical foram coletadas das mulheres grávidas, e o DNA genômico foi extraído utilizando oQIAamp DNA BloodMini Kit (Qiagen, Alemanha) de acordo com o protocolo do fabricante. O teste por SNP microarray (Polimorfismo de Nucleotídeo Único) foi realizado utilizando o Illumina HumanCytoSNP-12 v2.1 BeadChip (Illumina, EUA). A política laboratorial no momento do teste era a de não relatar polimorfismos bem estabelecidos, CNVs que não continham genes e CNVs menores que 0,20 Mb. No entanto, trechos de homozigose maiores que 10 Mb eram relatados. Cariotipagem Todas as amostras de líquido amniótico ou sangue do cordão umbilical foram usadas para realizar o bandeamento G de acordo com o procedimento padrão, conforme descrito anteriormente. 25 Resultados Dados clínicos Entre as 8.430 gestações, 362 casos de CC foram diagnosticados por meio de ecocardiografia fetal, com frequência de 4,2%. A idade média das gestantes foi de 31,1 ± 5,1 anos, e a idade gestacional média do diagnóstico foi de 24,4 ± 3,8 semanas. Os 5 tipos mais comuns de CC foram, em ordem, comunicação interventricular (51,9%, 188/362), persistência da veia cava superior esquerda (13,0%, 47/362), defeitos do coxim endocárdico (0,9%, 33/362), artéria umbilical única (0,9%, 32/362) e arco aórtico do lado direito (0,8%, 29/362). Etiologia No total, 362 fetos foram diagnosticados com CC. Os testes genéticos encontraram111 casos comaneuploidia, 10 casos com anormalidade na estrutura dos cromossomos e 19 casos com CNVs patogênicas ou provavelmente patogênicas (Tabela 1). Os 222 casos restantes não apresentaram achados genéticos anormais. As anormalidades do número de cromossomos consistiram de: síndrome da trissomia do cromossomo 18 (61 casos), síndrome da trissomia do cromossomo 21 (31 casos) e síndrome da trissomia do cromossomo 13 (19 casos). A CMA identificou 19 CNVs, incluindo síndrome de DiGeorge (8 casos), síndrome de Jacobsen (2 casos), síndrome de Angelman/ 572