ABC | Volume 111, Nº2, Agosto 2018

Artigo Original Zhong et al Pioglitazona e via de sinalização de VEGFR-2 Arq Bras Cardiol. 2018; 111(2):162-169 Figura 3 – A pioglitazona e o apatinib regulam a sinalização de VEGFR-2 em cardiomiócitos de ratos neonatais após hipertrofia induzida por Angiotensina II (n = 12 em cada grupo). (A e B) Western blot dos níveis de fosfo-VEGFR-2, VEGFR-2, fosfo-mTOR, mTOR, fosfo-Akt, Akt, Bax, fosfo-P53 e P53 em cardiomiócitos de ratos neonatais sob estímulo hipertrófico e tratados com pioglitazona (20 μM) ou apatinib (2 μM) por 24 horas, e (A) intensidade das bandas normalizadas para GAPDH. Todos os dados são apresentados em médias ± DP. *p < 0,01 em comparação ao grupo controle; # p < 0,01, em comparação à pioglitazona 20 μM, calculados por one-way ANOVA seguido do teste de Bonferroni para comparações pareadas. Controle Pioglitazona 20 µM Apatinib 2 µM Controle Pioglitazona 20 µM Apatinib 2 µM Controle Pioglitazona 20 µM Apatinib 2 µM Controle Pioglitazona 20 µM Apatinib 2 µM Controle Pioglitazona 20 µM Apatinib 2 µM Controle Pioglitazona 20 µM Apatinib 2 µM A B pVEGFR2 (Tyr1175) VEGFR2 pmTOR (Ser2448) mTOR pAkt (Thr308) Akt bax pP53(Ser15) P53 GAPDH pVEGFR2 (Tyr 1175) tnormalizad Expressão relativa da proteína Bax pP53 (Ser15) normalizada pAKT (Thr308) normalizada pmTOR (Ser2448) normalizada 1,5 0,5 1,0 0,0 1,5 0,5 1,0 0,0 1,5 0,5 1,0 0,0 4 3 2 1 0 4 3 2 1 0 * * * * * *# *# *# *# *# controversos sobre o efeito da pioglitazona na IC ainda não claras. Por isso, a investigação de alvos cardiovasculares da pioglitazona é uma abordagem promissora para esclarecer o efeito da droga sobre desfechos cardiovasculares. Os efeitos da pioglitazona sobre o sistema cardiovascular forampreviamente publicados. Em ratos, a pioglitazona atenuou a hipertrofia ventricular direita induzida por monocrotalina e fibrose, e diminuiu o tamanho dos cardiomiócitos. 23 A pioglitazona (2,5 mg/Kg) melhorou a disfunção cardíaca sistólica e diastólica em um modelo de hipertensão induzida por Ang II em ratos. 24 Além disso, a pioglitazona preveniu a hipertrofia de cardiomiócitos induzida por Ang II inibindo-se as vias de sinalização de AKT/GSK3 β e MAPK. No entanto, a pioglitazona (40 mg/Kg) induziu a hipertrofia cardíaca com aumento do volume plasmático, sem afetar seus efeitos cardíacos metabólicos e sobre a sensibilidade insulínica em todo o corpo. 25 Esses achados contrastantes podem ser causados por diferenças nas doses de pioglitazona utilizadas, uma vez que o tratamento com essa droga em doses supraterapêuticas induz cardiotoxicidade. 26,27 Análise proteômica dos perfis de ligação off-target para a pioglitazona sugeriu fontes potenciais de eficácia e de cardiotoxicidade – distúrbios na função mitocondrial e nos canais de íons cardíacos, e ruptura na sinalização simpática cardíaca. 28 No presente estudo, a pioglitazona induziu a apoptose e inibiu a hipertrofia dos cardiomiócitos, o que indica, a nosso ver, que o tratamento com pioglitazona não é vantajoso em pacientes com IC. Foi relatado um número aumentado de células apoptóticas no coração de ratos espontaneamente hipertensos, sugerindo que a apoptose pode ser ummecanismo envolvido na redução da massa cardíaca, que acompanha a transição de um estado de compensação estável para IC nesse modelo. 29 Ainda, a apoptose de cardiomiócitos é um fator determinante ainda mais crítico na transição de uma hipertrofia cardíaca compensatória à IC. 30 Contudo, estudos sobre os possíveis mecanismos da pioglitazona sobre fatores de risco cardiovasculares foram conduzidos, até o momento, em condições in vitro e, por isso, estudos coortes prospectivos são necessários para confirmar tais efeitos. Neste estudo, abordagens de rastreamento reverso ( docking e mapeamento farmacofórico) foram utilizadas para identificar potenciais proteínas alvo da pioglitazona, relacionadas com doença cardiovascular. A pioglitazona pode estar relacionada com a regulação da angiogênese, formação de neoíntima, e aterosclerose associadas com vias que envolvem o VEGFR-2. 31-33 O VEGFR-2 é um receptor de tirosina quinase que se dimeriza ao se ligar ao composto ligante e é ativado por trans‑fosforilação. 33 A ativação do VEGFR-2 estimula sinalização downstream , incluindo a ativação de vias de c-Raf/MEK/ERK e PI3K/Akt, levando ao aumento de proliferação, migração e sobrevida das células. 34,35 Em nosso estudo, identificamos 167