ABC | Volume 111, Nº2, Agosto 2018

Artigo Original Farsky et al Inflamação persistente após stent Arq Bras Cardiol. 2018; 111(2):134-141 Tabela 1 – Dados biodemográficos dos grupos estudados: com prévia implantação de stent e controle Variáveis Grupo Stent Grupo Controle p valor Casos 41 26 Idade (anos) 60,2 ± 7,1 6,3 ± 8,69 0,004 Sexo feminino (%) 13 (31,3) 8 (30,8) 0,58 Contagem de plaquetas 237.355 ± 70.831 269.560 ± 74.461 0,12 Hipertensão (%) 35 (85,4) 22 (84,6) 0,60 Diabetes (%) 17 (42,5) 8 (36,4) 0,42 Tabagismo atual (%) 4 (10,5) 3 (14,3) 0,48 AVE (%) 2 (5,3) 0 0,43 Doença renal crônica (%) 2 (5,3) 0 0,43 Dislipidemia (%) 25 (62,5) 16 (64) 0,56 Infarto do miocárdio (%) 14 (35,9) 5 (22,7) 0,22 FEVE < 50% (%) 14 (41,2) 2 (9,1) 0,009 AAS (%) 41 (100) 26 (100) 1,00 Estatinas (%) 41 (100) 26 (100) 1,00 AVE: acidente vascular encefálico; FEVE: fração de ejeção ventricular esquerda; AAS: ácido acetilsalicílico. Idade e contagem de plaquetas expressas como média ± desvio-padrão. Sexo, hipertensão, diabetes, tabagismo, AVE, doença renal crônica, dislipidemia, infarto do miocárdio, FEVE < 50%, uso de AAS e de estatina expressos em números e porcentagens dos pacientes estudados. Adotou-se o nível de significância estatística de p < 0,05. concentrações decrescentes (100%, 90%, 75%) de álcool etílico. A recuperação do antígeno foi realizada usando-se o tampão Trilogy® (Cell Marque, California, EUA) em equipamento Decloaker a 90°C por 40 minutos (Biocare Medical, CA, EUA). Os bloqueadores específicos (Erviegas EasyPath, DuraEdge, EUA) foram aplicados para bloqueio de peroxidase endógena e proteínas. Na próxima etapa, as lâminas foram incubadas com os respectivos anticorpos primários previamente titulados e diluídos em diluente universal (Erviegas EasyPath, DuraEdge, EUA). Usaram-se os anticorpos primários para interleucina-6 (IL-6) (ab6672), ICAM (ab2213), VCAM (ab106777), TNF‑alfa (ab1793), IFN-gama (ab9657), CD40 (ab58612) e NFKB (ab16502) de Abcam (Cambridge, MA, RU). A reação de imunoperoxidase foi realizada com Mach4 Kit Universal HRP Polymer + DAB (Biocare Medical, California, EUA), sendo, por fim, as lâminas coradas com hematoxilina de Harris (Erviegas EasyPath, DuraEdge, EUA) e montadas em resina sintética Erv-Mount (Erviegas EasyPath, DuraEdge, EUA). O controle positivo da reação de imuno-histoquímica foi realizado usando-se tecidos com os mesmos antígenos construtivos do antígeno de interesse. Após o processamento de imuno-histoquímica, as lâminas foram digitalizadas em unidade de Scanscope CS System (Aperio Technologies, Inc., CA, EUA), com uma objetiva 20x Olympus UPlanSApo com especificações 20x/0,75 acoplada ao scanner , gerando arquivos de imagem em formato svs. As imagens digitalizadas foram analisadas com o programa de visualização Aperio ImageScope (Aperio Technologies, Inc., CA, EUA), que informa a porcentagem de áreas coradas positivamente em relação à área total do tecido. Análise estatística As variáveis contínuas foram expressas como média e desvio‑padrão oumediana e intervalo interquartil, dependendo da suposição de normalidade. As variáveis categóricas foram expressas como frequências absoluta e relativa. Os valores entre os grupos foram comparados pelo teste t de Student não pareado após avaliar-se a distribuição quanto à normalidade com o teste Kolmogorov-Smirnov; de outro modo, usou-se o teste U de Mann-Whitney não paramétrico. O teste exato de Fisher ou o qui-quadrado foi usado para as variáveis categóricas com escalas nominais. Para a comparação dos marcadores do tecido arterial, usou-se o teste de Kruskal-Wallis (ou ANOVA, suposição de normalidade), deixando-se o teste de Tukey para as comparações múltiplas não paramétricas. Adotou‑se um valor de p < 0,05 como estatisticamente significativo. Usou‑se a versão 19 do SPSS. Para detectar 3 unidades com desvio-padrão de 4, poder de teste de 80% e alfa de 5%, o tamanho da amostra foi calculado em 105 casos. Resultados Características clínicas dos grupos do estudo As frequências das características clínicas (Tabela 1), como sexo, diabetes, dislipidemia, tabagismo, acidente vascular encefálico prévio e infarto do miocárdio, foram semelhantes nos dois grupos. Entretanto, o grupo de stent apresentou idade menor emaior prevalência de disfunção ventricular, caracterizada por fração de ejeção menor do que 50%. O grupo controle apresentou maior contagem de plaquetas (269.560 ± 74.461) do que o grupo de stent (237.355 ± 70.831), porém sem significância estatística (p = 0,12). Todos os pacientes eram tratados com estatinas e ácido acetilsalicílico. O tempo decorrido entre a implantação de stent e a cirurgia de RVM foi superior a 6 meses. Nove pacientes 136