ABC | Volume 110, Nº4, Abril 2018

Artigo Original Nascimento et al Vimentina e Anticorpos Anti-Vimentina na Doença de Chagas Arq Bras Cardiol. 2018; 110(4):348-353 Figura 1 – Distribuição do antígeno de Vimentina ou Trypanosoma cruzi em células de controle ou infectadas e parasitas. A e B) células LLC MK2 não infectadas reagiram a anti-vimentina abs (A) ou anti-T.cruzi abs (B). C e D) Células MK2 infectadas. Células LLC MK2 infectadas com T.cruzi reagiram a anti-vimentina abs (C) ou anti-T.cruzi abs (D). E e F) Formas de cultura in vitro de promastigotas T.cruzi reagiram a anti-vimentina abs (E) ou anti- T.cruzi abs (F). As células, células infectadas ou formas parasitas foram reagidas com mAb anti-vimentina ou soro de Chagas cronicamente infectado e reveladas com um conjugado adequado (x1000) (ver Métodos). fora do vacúolo parasitóforo e algumas partículas com padrões de sombreamento, sugerindo que a vimentina está associada com o citoplasma da célula (Figura 1C). A vimentina poderia envolver parasitas citoplasmáticos não corados, mas não foi observada coloração específica de parasitas. Estes parasitas foram facilmente identificados por anticorpos anti- T. Cruzi mostrando um padrão morfológico típico no citoplasma de células infectadas (Figura 1D). Não se observou qualquer coloração destes parasitas mAbs anti-vimentina, demonstrando a ausência de mimetismo antigénico, para os amastigotas (Figura 1C) e os parasitas extracelulares (Figura1E). Estes parasitas extracelulares são fortemente corados por anticorpos de T. Cruzi , bem como por amastigotas intracelulares (Figura 1F). Autoanticorpos anti-vimentina Procuramos anticorpos anti-vimentina em soros humanos de controles ou pacientes com tripanossomíase americana. Nossa amostra foi composta de pacientes com formas clínicas bem definidas, conforme descrito em Métodos. O ELISA Vimentina foi preparado com proteína comercial e a ligação do anticorpo foi revelada por conjugados comerciais. A padronização foi fácil, pois os controles foram adequadamente negativos, permitindo uma definição de corte adequada. Nós também testamos todas as amostras em um ensaio ELISA de alta especificidade, o TESA, o qual usa um antígeno secretado excretado em fase sólida, com alta reatividade em todas as formas clínicas de tripanossomíases americanas. Esses ensaios podem ser vistos na Figura 2. Nós demonstramos claramente que todos os pacientes em nossa amostra de tripanossomíase americana reagiram muito bem no teste TESA, sem amostras falso positivas ou duvidosas nos grupos controle. Todas as formas clínicas apresentaram uma reatividade similar para os antígenos parasitas, incluindo aqueles com infecção assintomática. Os anticorpos anti‑vimentina estavam presentes na maioria das amostras de tripanossomíases americanas, mas eles estão notavelmente mais presentes em síndromes agudas ou definidas clinicamente (76,9%), especialmente 350