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Arquivos Brasileiros de CardiologiaResumos das Próximas Publicações
Ano 2002Modelo Experimental de Transfecção Gênica em Miocárdio Normal de Cães. Perspectivas de Terapia Gênica para o Tratamento da Cardiopatia Isquêmica
Renato A. K. Kalil, Leonardo A. K. Teixeira, Eduardo T. Mastalir, Paulo Moreno, Cecília H. Fricke, Nance B. Nardi
Objetivo - Avaliar a transfecção do gene que codifica para proteína verde fluorescente (EGFP) por meio de injeção intramiocárdica direta e sua detecção em miocárdio normal de cães. Métodos – Utilizado vetor plasmidial pREGFP construído por subclonagem do gene EGFP, a partir do plasmídio comercial pEGFP-N1 entre os sítios de clonagem 5’ KpnI-NotI 3’ do vetor plasmidial pREP9. O gene EGFP foi inserido a jusante do promotor constitutivo do vírus do sarcoma de Rous. Foram utilizados cinco cães machos (média de 13,5kg), nos quais foram injetados 0,5ml de solução salina (n=1) ou 0,5ml de solução plasmidial contendo 0,5m g de pREGFP/cão (n=4) no miocárdio da parede lateral do ventrículo esquerdo e uma semana após, foram sacrificados para realização de biópsias cardíacas, seccionadas em espessura de 5,0m m e dispostas em lâminas de microscopia. Resultados - A microscopia de fluorescência apresentou diferenças entre as células não transfectadas e as transfectadas com o plasmídio pREGFP. Fluorescência discreta foi observada nas fibras cardíacas que receberam solução salina; entretanto, as células miocárdicas transfectadas com pREGFP apresentaram franca expressão da EGFP. Conclusão – A transfecção com gene EGFP no miocárdio de cães normais é eficaz e a reprodução dessa eficácia no emprego do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), ao invés de EGFP, visa o desenvolvimento da terapia gênica para a cardiopatia isquêmica, induzindo angiogênese por meio de injeções intramiocárdicas de plasmídios específicos. Palavras-chave: terapia gênica, transfecção gênica, cardiopatia isquêmica Instituto de Cardiologia do Rio Grande do Sul/Fundação Universitária de Cardiologia e Universidade Federal do Rio Grande do Sul Correspondência: Renato A. K. Kalil - Unidade de Pesquisa do
IC/FUC - Av. Princesa Isabel, 395 - 90620-001 - Porto Alegre, RS
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